呼鸽子疫病检测报告
(一) 样品来源及处理方法
1、样品信息:呼市病鸽(死亡)样品,分别命名为1#、2#、3#、4#、5#、6#。
2、样品处理:无菌条件下,取每个样品脑、肺、肝脏、脾脏和胰腺等组织,加生理盐水充分研磨后,12000rpm离心10min,取上清用于核酸的提取。
(二) 试验方法及步骤
1、病毒DNA/RNA提取:按Anxgen基因组提取试剂盒说明书进行操作,获得样品的DNA和RNA。
2、病毒RNA反转录:依据天根一步法反转录试剂盒说明书进行操作,得到样品的cDNA。
3、利用本实验室建立的鸽I型副黏病毒、圆环病毒、疱疹病毒、腺病毒和轮状病毒检测方法,进行PCR检测。
(三) 试验结果
1、 剖检情况如下
编号1-6#,分别对应21.9.6死亡鸽5只,21.9.5死亡鸽1只。
剖检可见病变基本一致,脑不同程度出血,脾脏、肠道出血严重;肾脏肿大,表面有出血。
2、 PCR鉴定
图1 鸽I型副黏病毒(两对引物)和鸽轮状病毒PCR检测结果
(I型副黏病毒两对引物,目的条带大小295bp和800bp)
1-6#全为鸽I副粘病毒阴性;全为鸽腺病毒阴性
图2 鸽圆环病毒检测PCR结果
(目的条带大小325bp)
样品1、3、5、6#为鸽圆环病毒阳性
图3 鸽疱疹病毒PCR检测结果
样品1-6均为鸽疱疹病毒阴性
图4 鸽腺病毒PCR检测结果
(两对引物,目的条带大小1000bp和700bp)
全为鸽腺病毒阳性
3、 结果分析
6个样品均为鸽I副粘病毒、疱疹病毒和轮状病毒阴性,样品1、样品3、样品5、样品6为鸽圆环病毒阳性,所有样品全为腺病毒阳性。
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